小鼠支氣管上皮細(xì)胞

1）收貨前根據(jù)說(shuō)明書培養(yǎng)條件，提前準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)所需材料。
2）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
3）收貨后沒(méi)有外觀損壞的情況下用75%酒精消毒后將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h等待細(xì)胞穩(wěn)定。
4）細(xì)胞穩(wěn)定后在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，判斷細(xì)胞的密度并清晰拍照200倍400倍照片最少2張記錄反饋細(xì)胞狀態(tài)以防出現(xiàn)售后作為證據(jù)，沒(méi)有照片和反饋默認(rèn)接受細(xì)胞質(zhì)量沒(méi)有問(wèn)題。
5）貼壁細(xì)胞：在運(yùn)輸過(guò)程中由于運(yùn)輸顛簸貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象，如發(fā)現(xiàn)有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長(zhǎng)，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)皿中，按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件加入新配制的完全培養(yǎng)基。
6）懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基）。

注意事項(xiàng)：
A.傳代比例：
1個(gè)T25瓶傳2個(gè)6cm的培養(yǎng)皿或者2個(gè)T25瓶相當(dāng)于1:2
1個(gè)T25瓶傳1個(gè)10cm的培養(yǎng)皿或者1個(gè)T75瓶相當(dāng)于1:3
B.由于原代細(xì)胞的傳代次數(shù)和活性是有限的，因此收到細(xì)胞后需要規(guī)劃培養(yǎng)傳代和做實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)，以防出現(xiàn)原代細(xì)胞本身壽命已達(dá)最大限度時(shí)候才開始做實(shí)驗(yàn)，因?yàn)檫@個(gè)時(shí)候的原代細(xì)胞很可能增值能力，形態(tài)，狀態(tài)都已經(jīng)不是很好了，所以最好提前做好預(yù)估判斷。

原代細(xì)胞發(fā)貨建議常溫活細(xì)胞發(fā)貨狀態(tài)更加穩(wěn)定。我們發(fā)貨的原代細(xì)胞T25瓶包裝，細(xì)胞密度一般在80%上下，充液為常規(guī)培養(yǎng)完全培養(yǎng)基，客戶可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)方案決定是否需要收集起來(lái)繼續(xù)使用3-4天還是抽掉丟棄。